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使用檢測試劑盒進行試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應。
  在檢測試劑盒中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
  固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯yixi、聚苯y(tǒng)ixi、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯y(tǒng)ixi凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
  包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
  檢測試劑盒使用的注意事項:
  1.本試劑盒僅適用于對豬血清或血漿中豬瘟病毒抗體的檢測,不能用于其他畜類樣品的檢測。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
  2.試劑盒保存于2-8℃,使用前整套試劑應平衡至室溫。
  3.試劑開封后如未用完,板條應和干燥劑一起放入自封袋內(nèi)密封2-8℃保存,一周內(nèi)使用,其它液體組份使用后瓶蓋應擰緊置2-8℃保存,一周內(nèi)使用。
  4.檢測時必須設置空白對照(只加顯色劑和終止液,不加酶標結合物),并在結果分析時,單波長測定應扣除空白值,雙波長測定不應扣除空白值。
  5.注意控制反應時間,溫育30分鐘應控制在30±2分鐘內(nèi),溫育10分鐘應控制在10±1分鐘內(nèi),避免因反應時間縮短或延長而造成整體顯色降低或升高。
  6.試劑過期不得使用,不同批號的試劑盒中的組份不得混用,封板膜不得重復使用,試劑瓶蓋切勿交叉使用。